随着我国经济和饲料工业的迅速发展,各类饲料及食品添加剂的 使用也日益增加。烟酸(niacin),属于 B 族维生素,是机体维持生 理功能的必须营养素。除了作为机体必须的营养素外,烟酸具有全 面的调血脂作用,而近年来烟酸作为营养药物、食品及家畜饲料添加 剂中的主要成分更是受到广泛的关注。烟酸的营养支持及机体代谢 调节作用基础目前尚未完全揭示,其是否具有抗氧化活性目前研究甚 少。本文以烟酸为研究对象,研究其体外抗氧化活性,以期为饲料及 食品添加剂烟酸的营养支持作用提供一定的理论基础和依据。
752型紫外可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司); Secura324-1CN精密天平(德国赛多利斯分析天平);恒温水浴锅(上海精宏实验设备有限公司)。
烟酸(NA)、1,1- 二苯基苦基苯肼(DPPH)、1,10- 菲罗啉均购 自美国 Sigma-Aldrich 公司;L- 抗坏血酸(维生素 C)、H2O2、硫酸亚 铁、乙醇、硫代巴比妥酸、三氯乙酸均为分析纯。
取 2.1mM1,10- 菲罗啉溶液 1mL 置入试管中,加入 2mL 磷酸盐缓 冲溶液(PBS)和 1mL 双蒸水混匀,再加入 1mL 硫酸亚铁溶液混匀, 最后加入1mL H2O2溶液,37℃温育60min,在536nm波长下测定吸光度, 为A(损);用1mL蒸馏水代替H2O2,测的吸光度值为未损伤管A(未); 用不同浓度样品溶液代替双蒸水,测出的吸光度为 A(样)。 清除率(%)=[A(样)-A(损)]/[A(未)-A(损)]×100
取不同浓度样品溶液 2mL 和 DPPH• 溶液 2mL 加入到试管中摇匀、 室温静置 30min,在 517nm 波长处测定吸光度值 Ai ;在 2mL DPPH• 标准溶液中加入 2mL 无水乙醇,震荡混合,在 517nm 波长处测定吸 光度值 A0;试管中加入 2mL 不同浓度的样品溶液和 2mL 无水乙醇, 摇匀、避光放置 30min 后,在 517nm 波长处测定吸光值 Aj 。 清除率(%)=[1-(Ai -Aj )/A0]×100%
新鲜鸡蛋去卵清,卵黄用等体积的 PBS 缓冲液配制成 1:1 的卵黄 悬液,同方向匀速搅拌 10min,再用 PBS 稀释成 1:25 的卵黄悬液。吸 取卵黄悬液 0.2mL,分别加入 0.1mL 不同浓度样品溶液,0.2mL 25mM 硫酸亚铁溶液,加入 1.5mL PBS 缓冲液,在 37℃水浴下反应 30min, 加 1mL 20% 三氯乙酸,混匀 3500r/min 离心 15min,取上清液 2mL, 加 1mL 0.8% 硫代巴比妥酸溶液,沸水浴 15min 冷却后 532nm 下测定 吸光度值,以 0.1mL 蒸馏水代替样品作为空白对照管。 清除率 =(A0-A)/A0×100% 其中,A0 为空白对照管吸光度,A 为样品吸光度。
在试管中加入 0.5mL 样品溶液,2.5mL 的 PBS 缓冲液和 2.5mL 铁 氰化钾溶液,震荡均匀,50℃水浴 20min,流水冷却,然后加入 2.5mL三氯乙酸溶液。混匀后,用 3000r/min 离心 10min。吸取上清液 2.5mL 置于新的离心管中,再加入 2.5mL 蒸馏水和 0.5mL 三氯化铁溶液,混 合均匀后,用紫外分光光度计在 700nm 波长下测定吸光度。
机体过量的自由基则会引起蛋白质变性、酶失活、多糖降解、 DNA 链断裂、生物膜结构损伤、细胞解体乃至机体病变和死亡。从 图1结果可知,随着烟酸浓度增加,其对羟基自由基的清除率逐渐增大。 当烟酸浓度为 0.5mg/mL 时,羟基自由基清除率为 21.83%,表明烟酸 具有一定的清除羟基自由基的作用。
DPPH 自由基溶液在 517nm 处有强吸收,每个 DPPH 分子在溶液 中可生成一个稳定的含氮自由基,当它与提供 1 个电子的自由基清除 剂作用时,生成无色产物使溶液的典型紫色变浅。图 2 表明,随着烟 酸浓度的增加,其对 DPPH 自由基的清除率增大,揭示烟酸具有一定 的体外抗氧化活性。
随着烟酸浓度的增加,烟酸对卵黄脂蛋白体系中脂质过氧化作用 抑制率也随之增加,其抑制作用与烟酸浓度呈现一定的量效关系。烟酸对卵黄脂蛋白脂质过氧化物有较好的抑制作用,最大抑 制率为 61.02%。
旋压成型技术作为金属回转体加工中新兴的一种特种成型技术, 自产生以来,已经做了大量的理论研究工作,应用也日益广泛,但 对旋压超薄壁件的研究相对甚少,尚没有形成较为全面、系统、可靠 的超薄壁旋压基础理论及质量控制体系给予技术支持。上述深筒薄壁 铜零件的旋压成型工艺对类似深筒薄壁零件旋压提供了很好的借鉴作 用。在实际加工中,还需要通过不断的试验和积累,才能选出合适的 加工方案,旋压加工出合格的产品。