鬼灯笼提取物分析（精宏培养箱使用）

鬼灯笼( Clerodendrum fortunatum L． ) 又名灯笼草， 为马鞭草科植物白花灯笼的茎、叶，主产于广东、广西， 微苦、微甘，性凉，有清热止咳、解毒消肿的功效，主治 肺痨咳嗽、骨蒸潮热、跌打损伤、咽喉肿痛、疖肿疔疮。 鬼灯笼根有清热解毒、凉血消肿的功效，主治感冒发 热、咳嗽、咽痛、跌打肿痛等。有研究表明，白花灯 笼水提取物和醇提取物有较强的抗补体活性。

1 仪器与材料

1． 1 仪器

RE52AA 旋转蒸发仪( 上海亚荣生化仪器厂) ; 电 热恒 温 培 养 箱 ( 上海精宏实验设备有限公司) ; GI54DWS 型高压蒸汽灭菌箱。

1． 2 菌株及培养基

金黄色葡萄球菌、金黄色葡萄球耐药菌、铜绿假单 胞菌、大肠埃希杆菌、表皮葡萄球菌、伤寒沙门氏菌、粪 肠球菌、屎肠球菌、无乳链球菌和化脓性链球菌均为标 准菌株，购自中国药品生物制品检定所; 营养琼脂培养 基( 杭州滨和微生物试剂有限公司) 。

1． 3 药材

采自广西北流市，经广西植物所宁世江鉴定为马 鞭草科植物白花灯笼( Clerodendrum fortunatum L． ) 的 全株

2 方法与结果

2． 1 样品的制备

鬼灯笼水提物: 称取鬼灯笼药材粗粉 20 g，加入 10 倍量的水冷浸 1 h，煎煮 2 次，每次 1 h，过滤，合并 2 次滤液，滤液用旋转蒸发仪进行减压浓缩，制成含药 量为 1 g /mL 的药液，冷藏备用。 鬼灯笼 70% 乙醇提物: 称取鬼灯笼药材粗粉20 g， 加入 10 倍量的 70% 乙醇先冷浸 1 h，然后回流提取 2 次，每次 1 h，过滤，合并 2 次滤液，滤液用旋转蒸发 仪进行减压浓缩，制成含药量为 1 g /mL 的药液，冷藏 备用。 将鬼灯笼水和 70% 乙醇提取物，各配制成含相当于 原药材浓度为 1 000 mg /mL，500 mg /mL，250 mg /mL， 125 mg /mL，62． 5 mg /mL，31． 3 mg /mL，15． 6 mg /mL， 7． 8 mg /mL，3． 9 mg /mL，1． 9 mg /mL 的浓度系列。

2． 2 菌悬液的制备

将 10 种活化培养后的菌株接种于无选择性的 LB 琼脂培养基上，按照相应培养条件培养。挑选新鲜 菌落，悬浮于生理盐水中，振荡混匀，以 0． 5 号麦氏比 浊管为标准，调整细菌浓度为 1． 5 × 106 cfu /mL 的菌 量，备用。

2． 3 纸片药敏实验

无菌条件下，将上述 10 种菌株混悬液分别接种到 普通营养培养基表面，每种细菌平行接种 3 个平板，将 药敏片贴于平板上，每个平板贴 4 片，其中一片为阴性 对照。37 ℃ 培养 24 h，24 h 后观察抑菌效果。在 纸片周围抑菌浓度范围内，测试菌的生长被抑制形成 透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映了测试菌对鬼灯笼提取物的敏感程度。

2． 4 MIC 实验

将定性滤纸制成的 6 mm 圆形纸片，灭菌烘 干后，分别取若干纸片浸泡于上述 20 份溶液中 2 h，烘 干后备用; 浸泡于无菌蒸馏水中做阴性对照，其他处理 条件同前。

3 结果

鬼灯笼的水提物和 70% 乙醇提取物对革兰阳性 菌如金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌显著的抑制其生 长，但对金黄色葡球耐药菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希 菌、伤寒沙门氏菌、粪肠球菌、屎肠球菌、无乳链球菌和 化脓性链球菌则无抑制其生长的作用; 而 70% 乙醇提 取物对化脓性链球菌有一定抑制生长。

4 小结

鬼灯笼有清热止咳、解毒消肿的功效。体外抑菌 实验结果表明，鬼灯笼水和 70% 乙醇提取物均对金黄 色葡萄球菌和表皮葡萄球菌均具有明显的抑菌作用， 水和 70% 乙醇提取物对金黄色葡萄球菌的最小抑菌 浓度均为 125 mg /mL; 而对表皮葡萄球菌的最小抑菌浓 度上有差别，水提物的最小抑菌浓度为 62． 5 mg /mL， 70% 乙醇提取物的最小抑菌浓度为 32． 25 mg /mL。鬼 灯笼的水和 70% 乙醇提取物所含成分比较复杂，至于 何种成分起作用有待下一步研究，本实验的研究结果 将为鬼灯笼不同部位的抑菌能力考察提供一定依据。



 

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