振荡培养箱用于发酵香菇残次品产蛋白酶优化！

    米曲霉（Aspergillus oryzae）属于曲霉属，主要存在 于发酵食品、粮食、土壤以及腐败的有机物中，是美国食 品与药品管理局和美国饲料公司协会发布的安全菌种之一。米曲霉是一类可以产复合酶的菌种，菌丝一般由多 细胞组成，能够产生丰富的蛋白酶系，包括碱性蛋白酶，中 性蛋白酶和酸性蛋白酶，中性蛋白酶能耐受较高的温度。DL-5-C高速冷冻离心机：上海予皓科学仪器有限公司； ET-2010KA立式双门回旋摇床：金坛市亿通电子有限公司； UV-1800紫外分光光度计：日本岛津（SHIMADIU）公司； HH-4恒温水浴锅：上海蓝凯仪器仪表有限公司；THZ-420电热 恒温振荡培养箱：上海精宏实验设备有限公司；HVE-50立 体式高压灭菌锅：上海三申医疗器械有限公司；SPX-250B-Z 生化恒温培养箱：上海博迅实业有限公司医疗设备厂； FSH-2高速匀浆机：常州亿通分析仪器制造有限公司。

    随着发酵时间在1～3 d范围内的延长，蛋 白酶活力曲线呈上升趋势；当发酵时间为3 d时，米曲霉蛋 白酶活力最高，为541.9 U/mL；当发酵时间＞3 d之后，蛋白 酶活力有所下降。分析原因可能是，在发酵前期（发酵时间 3 d前），随发酵时间的延长，米曲霉处于生长旺盛期，产蛋 白酶能力增强，因此米曲霉产蛋白酶活力提高。但发酵后 期（发酵时间3 d后），米曲霉产生的蛋白酶用于降解香菇 中蛋白质而消耗蛋白酶，因此发酵后期蛋白酶活力降低。 因此，选择最佳发酵时间为3 d。以米曲霉（Aspergillus oryzae）为菌种，对香菇残 次品进行液态发酵，在单因素试验基础上，采用Box-Behnken 试验方法优化米曲霉产蛋白酶活发酵条件。