真空干燥箱在半夏泻心汤的工艺改进的应用

我国慢性胃炎、胃溃疡发病率较高，统计数据 表明，发病率可达 60%以上，为临床上常见多发 病 。现代医学治疗胃炎、胃溃疡多对症处理，药 物多为吗丁啉和维酶素等，或针对主要致病因素——幽门螺杆菌（helicobacter pylori，HP）多种抗 生素联合治疗，如采用质子泵抑制剂加克拉霉素 加阿莫西林或甲硝唑三联疗法 。虽然取得一定 疗效，但愈后复发率高，且病程又长，服药时间长，还带来胃肠道不适、失眠、头昏、头痛等副作用，尤 其是随着抗生素的广泛使用，HP对常用抗生素的 耐药情况日益严重 。

T2K202中试提取机组、2K00401浓缩机组（江 汉医疗制药设备有限公司），2002 型旋转蒸发仪 （上海申胜生物技术有限公司），DZF6050 型真空干燥箱（上海精宏实验设备有限公司），CCPP-176 聚丙烯层析柱（天津市德固特科技发展有限公 司），Wistar 大鼠［（200±10）g，湖北中医药大学］， 姜半夏、干姜、黄芩、黄连、党参、灸甘草、大枣（湖 北强康中药饮片有限公司），AB-8树脂（安徽三星树脂有限公司），质量分数95%乙醇（药用级，湖南 尔康制药股份有限公司），水为注射用水（湖北科 益药业股份有限公司）。

水提对照样品制备：称取姜半夏 4 kg、黄芩 3 kg、干姜 3 kg、党参 3 kg、炙甘草 3 kg、 黄连2 kg、大枣2 kg，煎煮2次，每次2 h，第一次加 水 200 L，第二次加水 160 L，合并提取液，孔径为 150 μm筛过滤，减压浓缩，60 ℃真空干燥，粉碎至 细粉备用。

20%乙醇提取组分制备：称取姜半 夏 4 kg、黄芩 3 kg、干姜 3 kg、党参 3 kg、炙甘草 3 kg、黄连 2 kg、大枣2 kg，用质量分数为20%乙醇 （以下简称20%乙醇）加热回流2次，每次2 h，第1 次加 20%乙醇 200 L，第 2 次加 20%乙醇 160 L，合 并提取液，孔径为 150 μm 筛过滤，将滤液减压浓 缩至相对密度为1.10的浓缩液，浓缩液上AB-8型 大孔吸附树脂柱（20 kg AB-8树脂装柱，树脂重量 为药材重量的1倍），用20%乙醇85 L（为大孔吸附 树脂柱体积的5倍）洗脱树脂柱，收集洗脱液，减压 浓缩，60 ℃真空干燥，粉碎至细粉备用。

40%乙醇提取组分制备：称取姜半 夏 4 kg、黄芩 3 kg、干姜 3 kg、党参 3 kg、炙甘草 3 kg、黄连 2 kg、大枣2 kg，用质量分数为40%乙醇 （以下简称40%乙醇）加热回流2次，每次2 h，第1 次加 40%乙醇 200 L，第 2 次加 40%乙醇 160 L，合 并提取液，孔径为 150 μm 筛过滤，将滤液减压浓 缩至相对密度为1.10的浓缩液，浓缩液上AB-8型 大孔吸附树脂柱（20 kg AB-8树脂装柱，树脂重量 为药材重量的1倍），用40%乙醇85 L（为大孔吸附 树脂柱体积的5倍）洗脱树脂柱，收集洗脱液，减压 浓缩，60℃真空干燥，粉碎至细粉备用。

60%乙醇提取组分制备：称取姜半 夏 4 kg、黄芩 3 kg、干姜 3 kg、党参 3 kg、炙甘草 3 kg、黄连2 kg、大枣2 kg，用质量分数为60%乙醇 （以下简称60%乙醇）加热回流2次，每次2 h，第1 次加 60%乙醇 200 L，第 2 次加 60%乙醇 160 L，合 并提取液，孔径为 150 μm 筛过滤，将滤液减压浓 缩至相对密度为1.10的浓缩液，浓缩液上AB-8型 大孔吸附树脂柱（20 kg AB-8树脂装柱，树脂重量 为药材重量的1倍），用60%乙醇85 L（为大孔吸附 树脂柱体积的5倍）洗脱树脂柱，收集洗脱液，减压 浓缩，60 ℃真空干燥，粉碎至细粉备用。

1.2.5 样品5
 

80%乙醇提取组分的制备：称取姜 半夏 4 kg、黄芩 3 kg、干姜 3 kg、党参 3 kg、炙甘草3 kg、黄连2 kg、大枣2 kg，用质量分数为80%乙醇 （以下简称80%乙醇）加热回流2次，每次2 h，第1 次加 80%乙醇 200 L，第 2 次加 80%乙醇 160 L，合 并提取液，孔径为 150 μm 筛过滤，将滤液减压浓 缩至相对密度为1.10的浓缩液，浓缩液上AB-8型 大孔吸附树脂柱（20 kg AB-8树脂装柱，树脂重量 为药材重量的1倍），用80%乙醇85 L（为大孔吸附 树脂柱体积的5倍）洗脱树脂柱，收集洗脱液，减压 浓缩，60 ℃真空干燥，粉碎至细粉备用。

取健康Wistar大鼠，随机分为正常对照组、样 品1～5组，每组均10只，雌雄各半。1～5组的给 药剂量相同，即将干膏折算成生药材的重量，按 10 g生药材每1 kg体重进行灌胃给药，正常对照组 给予等容量蒸馏水。试验第一天上午各组分别灌 胃1次，下午开始禁食不禁水，第二、三天上午再分 别灌胃 1 次，第三天下午（即禁食 48 h 后）开始手 术。手术时，将大鼠用乙醚麻醉、沿腹中线切开腹 壁，找出胃与十二指肠，用缝合线避开血管结扎胃 幽门与十二指肠结合部，并由十二指肠再给药一 次，随后缝合腹壁、碘酊消毒后放回笼中，同时禁 食禁水。18 h后，拉颈椎处死大鼠，剖腹取出胃并 收集胃液，随即向胃内注入质量分数为1%福尔马 林溶液10 mL，再将胃放入质量分数1%福尔马林 溶液中固定 10 min 以上。然后沿胃大弯剪开胃， 将其平展于玻璃板上，仔细观察前胃部粘膜溃疡 的发生情况，并按下述标准进行溃疡分级。0：无 溃疡；1：溃疡点、出血点（＜1 mm）；2：1~5 个小 溃疡（＞1 mm，＜3 mm）；3：6个以上小溃疡或1个 大溃疡（＞3 mm）；4：2个以上大溃疡；5：穿孔性溃 疡 。

取健康 Wistar 大鼠，随机 分为正常对照组、样品1~5组，每组均10只，雌雄 各半。进行灌胃给药，正常对照组给予等容量蒸馏水。 连续 3 d，每天灌胃一次，最后一次灌胃后 0.5 h， 从大鼠左后肢足趾皮下注射新鲜蛋清0.1 毫升/只 致炎。致炎前测量一次踝关节周长，并于致炎后 2 h分别测量一次踝关节周长，计算关节肿胀率 。

幽门螺杆菌 （HP）是一种革兰阴性需氧螺杆菌，目前全世界超 过50%的人受其感染，是导致胃炎、胃溃疡的一种 最常见致病因素，WHO将其定为胃的Ⅰ类致病因 子 。本试验将考察不同分离部位对HP 的杀灭 效果。取健康Wistar大鼠，随机分为正常对照组、无治疗药物组、样品1～5组、每组均10只，雌雄各 半。除正常对照组外其余各组连续10天空腹灌胃 食醋2.5 mL/只；第11天，采用空腹束缚水浴6 h；从 第 12 天起，上述隔天空腹灌胃 HP 混悬液（1×109 CFU/mL）1.5 mL/只，共3次；第16天除正常对照组 和无治疗药物模型对照组外其余各组灌胃给药， 连续给药 10 天。第 25 天下午所有组动物禁食过 夜，次日将各组动物脱颈椎处死，在无菌的条件 下，取胃粘膜快速进行尿素酶试验和 HP 接种培 养，同时直接涂片观察HP阳性率。

用药效结果 各提取组分对大鼠幽门结扎型胃溃疡的抑制 作用药效试验结果用t值法进行统计分析，结果见 表1。

药效结果显示，采用 40%乙醇提取和洗脱得 到的提取组分（样品3）对大鼠幽门结扎型胃溃疡 具有显著的抑制作用，效果略优于传统水煎，表明 该分离部位对胃溃疡有较好的治疗作用。

本研究对半夏泻心汤提取方法进行工艺改 进，采用不同浓度的乙醇提取和纯化，得到不同的 提取组分，通过药效试验考察各提取组分抑制胃 溃疡、抗炎以及杀灭HP的作用，并与古代水煎工 艺进行对比。结果表明，采用质量分数为 40%乙 醇提取，并通过AB-8树脂富集，5倍量树脂体积的 40%乙醇洗脱得到的提取组分对胃炎、胃溃疡有 良好的治疗作用，在不影响药效的前提下，大大减 少了患者的服用量，为将古方制备成方便服用、质 量可控、易保存现代制剂（颗粒、片剂、胶囊、口服 液等）提供了技术和理论依据。