微生物限度检查方法检测优化，恒温恒湿使用！

    磺胺嘧啶银和 酮康唑是方中两种主药的成分，需进行含量测定， 且方中多种成分有抑菌作用，其微生物限度检查方 法的适用性应经过验证。为了更好地控制复方银 唑散的质量，本实验建立了高效液相色谱法同时测 定该制剂两种主药成分含量的方法并验证了该制 剂的微生物限度检查方法的适用性。Agilent 1200 型高效液相色谱仪（美国 安捷伦科技有限公司）；BSC-1100-LⅡB2 型生物安 全 柜（北 京 东 联 哈 尔 仪 器 制 造 有 限 公 司）； LDZH-150KBS型立式压力蒸汽灭菌器（上海申安医 疗器械厂）；HWS-400型恒温恒湿培养箱（上海精宏 实验设备有限公司）；LRHS-400-Ⅲ型恒温恒湿培养 箱（上海跃进医疗器械有限公司）；AUW120D 型电 子分析天平（精度 0.01 mg，日本岛津仪器有限公 司）；AUX22型电子分析天平（精度0.1 mg，日本岛津 仪器有限公司）；JJ1000型电子秤（精度 0.01 g，上海 浦春计量仪器有限公司）；PHSJ-3F 型酸度计（上海 华光仪器仪表经营销售有限公司）。

    磺胺嘧啶银的极性较强，易 被洗脱，而酮康唑极性较弱，难被洗脱，如果用等度 洗脱的方式会导致磺胺嘧啶银过早出峰或酮康唑 过晚出峰，因此，复方银唑散的含量测定采用梯度 洗脱的方式，既能保证两者的分离度又节省了时 间，利于提高工作效率。磺胺嘧啶银以较低比例的 甲醇和较高比例的三乙胺溶液进行洗脱，出峰后需 改用较高比例的甲醇和较低比例的三乙胺溶液继 续洗脱，基线中段出现一定程度的波动，但不影响 测定结果。磺胺嘧啶银溶于氨溶液、稀硝 酸，酮康唑溶于酸、微溶于乙醇。笔者曾用氨溶液 与乙醇的混合溶剂配制混合对照品溶液和供试品 溶液，后发现重复性试验结果酮康唑含量的RSD偏 大，回收率试验结果酮康唑偏低，经过反复试验证 明复方银唑散处方中的不溶性成分氧化锌对酮康 唑有吸附作用，对磺胺嘧啶银则无影响，因此改用 稀硝酸与水作为溶剂配制混合对照品溶液和供试 品溶液。