多克隆抗体制备之细胞培养箱使用！

    铁是动物、植物和微生物生长的重要元素，该元素 作为多种酶 的 活 性 中 心 并 且 参 与 了 呼 吸、基 因 调 控、 ＤＮＡ 合成、氧气运输等多个生物过程。与大多数生 物体一样，结核分枝杆菌也需要铁元素作为酶辅助因 子来参与多种生物过程。鉴于铁元素对结核分枝杆菌的重要性，因此，本研 究以牛结核分枝杆菌 ＢｆｒＢ蛋白为研究对象，通过对牛 结核分枝杆菌 ＢｆｒＢ蛋白进行生物信息学预测分析、表 达纯化及多克隆抗体的制备。ＰＣＲ 仪购自杭州柏恒科技有限 公司；恒温细菌培养箱购自上海精宏实验设备有限公 司；恒温水浴锅购自沙鹰科学（上海）仪器有限公司；恒 温水平摇床购自上海智城分析仪器制造有限公司；核 酸电泳仪购自北京六一生物科技有限公司。

    在人结核分枝杆菌中，ＢｆｒＢ蛋白已被证明在铁元 素的储存、维 持 铁 稳 态、致病性等方面发挥了重要作 用。以 牛 结 核 分 枝 杆 菌 ＢｆｒＢ 蛋 白 为 研究对象，对其进行生物信息学分析、克隆表达及多克 隆抗体的制备。ＢｆｒＢ蛋白由１８１个氨基酸组成，是一 种亲水性的非分泌蛋白，无跨膜结构域、信号肽。研究表明，固有无 序 蛋 白 与 病 原 菌 的 致 病 性 密 切 相 关。